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在日常細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，我們經(jīng)常需要計(jì)算細(xì)胞濃度，以進(jìn)一步確定接種濃度或細(xì)胞數(shù)量。盡管自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀提供了快速性，但對于某些細(xì)胞，尤其是那些處于復(fù)雜狀態(tài)的細(xì)胞，有研究表明其分析性能并不一致[1]（對于細(xì)胞形態(tài)的識別，所采用的是不一樣的方法）。

在臨床實(shí)踐中，因血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀通常無法精準(zhǔn)地識別細(xì)胞形態(tài)，所以需使用經(jīng)典的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行儀器校準(zhǔn)。利用顯微鏡手動(dòng)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，這種方法已經(jīng)被廣泛認(rèn)可[2]。

血細(xì)胞計(jì)數(shù)板規(guī)格及計(jì)數(shù)原理

血細(xì)胞計(jì)數(shù)板是一種經(jīng)典的細(xì)胞計(jì)數(shù)工具，具有上下兩個(gè)計(jì)數(shù)池。

在其上方覆蓋蓋玻片，形成深度為0.10mm的計(jì)數(shù)池。每個(gè)計(jì)數(shù)池分為9個(gè)大格，每個(gè)大格的規(guī)格為1.00mm×1.00mm。因視野所限，不易操作，容易造成較大誤差，所以一般采用定點(diǎn)（計(jì)數(shù)室4個(gè)角的大方格）取樣計(jì)數(shù)。（直徑較小的細(xì)胞如紅細(xì)胞，采用中間一個(gè)大方格內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)5個(gè)區(qū)域采集計(jì)數(shù)）

細(xì)胞濃度=（四個(gè)大方格的細(xì)胞數(shù)之和）/4×稀釋倍數(shù)×10⁴個(gè)Cell/mL

博大博聚細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的計(jì)數(shù)之道

博大博聚細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，沿用經(jīng)典血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)原理進(jìn)行研制（JJG 552-1988 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板試行檢定規(guī)程），并可搭載一次性細(xì)胞計(jì)數(shù)片，其細(xì)胞計(jì)數(shù)片與標(biāo)準(zhǔn)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池高度相同。

①在使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，儀器相當(dāng)于一個(gè)自帶電腦的自動(dòng)化顯微成像系統(tǒng)，屏幕能夠提供細(xì)胞高清圖像的實(shí)時(shí)預(yù)覽，精密的三軸聯(lián)動(dòng)控制系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)視野的精準(zhǔn)走位，實(shí)時(shí)自動(dòng)調(diào)焦，保證圖片的清晰度，并通過算法自動(dòng)進(jìn)行識別與計(jì)數(shù)。 

②在使用一次性細(xì)胞計(jì)數(shù)片時(shí)，儀器屏幕會(huì)顯示虛擬刻線，刻線對應(yīng)的實(shí)際大小經(jīng)“仿細(xì)胞校準(zhǔn)板(發(fā)明專利號：ZL 2020 21855359.4)”嚴(yán)格標(biāo)定，與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上的刻線面積（1*1mm²）一致。

③一次性細(xì)胞計(jì)數(shù)片的空腔高度設(shè)計(jì)嚴(yán)格標(biāo)定為0.1mm，計(jì)數(shù)體積（0.1mm³）與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板一致。

④在兩種耗材上，博大博聚細(xì)胞計(jì)數(shù)儀都采用標(biāo)準(zhǔn)的濃度計(jì)算公式，細(xì)胞濃度=（四個(gè)大方格的細(xì)胞數(shù)之和）/4×稀釋倍數(shù)×10⁴個(gè)Cell/mL。這使得博大博聚計(jì)數(shù)儀能夠?qū)崿F(xiàn)計(jì)數(shù)結(jié)果人工核對。

博大博聚的細(xì)胞計(jì)數(shù)新范式

博大博聚細(xì)胞計(jì)數(shù)儀支持非染色（發(fā)明專利號ZL 2013 1 0101403.0）、臺(tái)盼藍(lán)染色和熒光染色等多種計(jì)數(shù)模式。儀器預(yù)設(shè)多種細(xì)胞樣本類型，對于更復(fù)雜的細(xì)胞樣本，可通過自定義輔助判讀，以尋找最適合不具代表性樣本的識別參數(shù)并可無限新增。

無論是秉持傳統(tǒng)方法還是融合創(chuàng)新思路，博大博聚計(jì)數(shù)儀都旨在為細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析提供更全面的解決方案。

參考文獻(xiàn)：

[1] .Borzova E. The Absolute Basophil Count. Methods Mol Biol. 2020;2163:109-124.

[2] Zhang M, Gu L, Zheng P, et al. Improvement of cell counting method for Neubauer counting chamber. J Clin Lab Anal. 2020;34:e23024.